血小板輸注是治療嚴(yán)重血小板減少癥患者的關(guān)鍵救命手段。目前，血小板制劑主要依賴于志愿獻血者的全血捐獻。健康獻血者的有限可及性、血小板短暫的保質(zhì)期及其易受污染的特性，共同對血小板供應(yīng)構(gòu)成了重大制約。此外，許多患者需要反復(fù)輸注血小板，進一步加劇了現(xiàn)有的供需失衡。近年來，干細(xì)胞研究和再生醫(yī)學(xué)的飛速發(fā)展為解決臨床血小板短缺問題帶來了創(chuàng)新思路。具體而言，利用干細(xì)胞誘導(dǎo)分化和細(xì)胞重編程技術(shù)，已能夠在體外生成巨核細(xì)胞（MKs）和血小板，為滿足日益增長的血小板產(chǎn)品需求提供了一條有前景的解決方案。

直接譜系重編程技術(shù)能夠促進生成適用于細(xì)胞治療應(yīng)用的所需細(xì)胞類型。多項研究表明，特定轉(zhuǎn)錄因子（TFs）的過表達可將小鼠或人源體細(xì)胞重編程為造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞（HSPCs）、紅系祖細(xì)胞以及巨核細(xì)胞（MKs）。然而，基于轉(zhuǎn)錄因子的重編程方法需要進行基因操作，這引發(fā)了安全性顧慮，并阻礙了其臨床應(yīng)用。相比之下，具有顯著優(yōu)勢的小分子化合物可以替代轉(zhuǎn)錄因子，將體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為所需細(xì)胞，包括誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）、造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞（HSPCs）、內(nèi)胚層祖細(xì)胞、神經(jīng)元和心肌細(xì)胞。此前報道過，由四種小分子[4M；Bix01294、RG108、PD0325901和丙戊酸（VPA）]組成的特定組合，能夠驅(qū)動臍血成紅細(xì)胞重編程為可生成血小板的巨核細(xì)胞。這一發(fā)現(xiàn)促使探索，是否可以將數(shù)量更豐富且在臨床上更易獲取的T細(xì)胞，通過化學(xué)重編程方法獲得巨核細(xì)胞命運。T細(xì)胞是體外生成巨核細(xì)胞的理想起始材料，在臍血或外周血單核細(xì)胞中占比達40%–70%。通過化學(xué)重編程將T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為巨核細(xì)胞，為安全高效地生產(chǎn)血小板提供了一種可行的種子細(xì)胞來源。

在本研究中，研究者觀察到，最初能成功將成紅細(xì)胞轉(zhuǎn)化為巨核樣細(xì)胞的4M小分子組合，在誘導(dǎo)CD3? T細(xì)胞化學(xué)重編程為誘導(dǎo)巨核細(xì)胞（iMKs）時效率相對較低。通過高通量小分子篩選，對重編程方案進行了優(yōu)化，并發(fā)現(xiàn)Janus激酶1（JAK1）抑制劑AZD4205能夠增強T細(xì)胞向iMKs的化學(xué)重編程效率。T細(xì)胞來源的iMKs表現(xiàn)出典型的巨核細(xì)胞特征和功能。單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq）揭示了iMKs的異質(zhì)性，鑒定出不同的iMK亞群，包括循環(huán)偏向、免疫偏向和產(chǎn)血小板偏向的巨核細(xì)胞。偽時間分析進一步描繪了這種異質(zhì)性背后的不同發(fā)育路徑。在功能上，iMKs在體外可生成前血小板結(jié)構(gòu)，并釋放血小板樣顆粒。體內(nèi)移植實驗進一步證實，輸注至血小板減少癥小鼠體內(nèi)的iMKs，能夠向外周血中釋放功能性人血小板。

實驗設(shè)計：

實驗原理：

在輸注誘導(dǎo)巨核細(xì)胞（iMKs）前，先用Clodronate Liposomes氯膦酸脂質(zhì)體清除小鼠體內(nèi)的巨噬細(xì)胞。

為什么要清除巨噬細(xì)胞？

在細(xì)胞移植研究中，清除受體小鼠的巨噬細(xì)胞是一個常見策略，主要基于以下考量：

1.減少免疫清除：巨噬細(xì)胞是重要的吞噬細(xì)胞，會識別并清除輸注的外來細(xì)胞（如人源iMKs）。提前清除它們，可以延長輸注細(xì)胞在體內(nèi)的存活時間，提高移植效率。

2.改善移植微環(huán)境：巨噬細(xì)胞參與炎癥反應(yīng)，清除后可能為輸注細(xì)胞創(chuàng)造一個更友好的“歸巢"和分化微環(huán)境。

3.標(biāo)準(zhǔn)化實驗條件：通過藥物清除，可以減少個體間巨噬細(xì)胞水平的差異，使實驗結(jié)果更具可比性。

關(guān)于氯膦酸鹽脂質(zhì)體ClodronateLiposomes：

•工作原理：ClodronateLiposomes里面的氯膦酸二鈉被包裹在脂質(zhì)體中，注射后會被巨噬細(xì)胞特異性吞噬。脂質(zhì)體在細(xì)胞內(nèi)被消化后，釋放高濃度的氯膦酸二鈉，從而誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡，實現(xiàn)清除目的。

•供應(yīng)商：荷蘭Liposoma 公司（荷蘭阿姆斯特丹）。

•貨號：CP-005-005

•品名：ClodronateLiposomes&Control liposomes

巨噬細(xì)胞清除劑在化學(xué)誘導(dǎo)重編程T細(xì)胞向巨核細(xì)胞的應(yīng)用原理，參考文獻信息如下。

論文信息：

論文題目：Efficient chemical reprogramming of human T cells into functional megakaryocytes and platelets

期刊名稱：Science Advances

時間期卷：Vol 12, Issue29(2026)

在線時間：2026年7月15日

DOI: 10.1126/sciadv.aeb31